Развитие молекулярно-генетической биологии привело к созданию точных методик, позволяющих установить биологическое родство.

В основе генетического исследования лежит сравнительный анализ материального носителя наследственности – дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК).

При оплодотворении происходит слияние геномов яйцеклетки и сперматозоида в результате чего образуется генотип нового организма. ДНК отца и матери в равной степени составляет геном ребенка.

Гены – функциональные единицы наследственности – существуют в одной из форм – аллелей.

Аллели отличаются последовательностью расположения нуклеотидов, что передается по наследству.

Тот факт, что все клетки, сформировавшие новый организм, содержат одинаковую ДНК – наполовину матери, наполовину отца – и позволяют определять степень родства тестируемых лиц.

Для этого изучаются короткие участки ДНК – локусы, которые повторяются с определенной очередностью. Они носят название ДНК-маркеров.

Комбинация из ДНК-маркеров составляет генетический профиль человека.

Методика проведения анализа ДНК

Стандартным материалом для генетической экспертизы является защечный эпителий, полученный при помощи мазка. Кроме того, выделить ДНК можно из любого биологического материала человека: крови, слюны, волос, ногтей, спермы, мочи.

• I этап – получение очищенной молекулы ДНК из биоматериала ребенка и возможного отца.
• II этап – определение фрагментов (локусов), наиболее подходящих для исследования.
• III этап – копирование ДНК-фрагментов в ходе полимеразной цепной реакции (ПЦР).
• IV этап – сравнение локусов ребенка и предполагаемого отца.

Цель исследования – нахождение совпадений каждого фрагмента (локуса) ребенка с таким же фрагментом у предполагаемого отца. Так как такие фрагменты могут встречаться и у других мужчин в популяции, для точности результатов необходимо наличие данных о частоте встречающихся аллелей.

Для установления отцовства проводится математический анализ вероятности совпадения аллелей ребенка и вероятного отца.

Официально в России принято, что при показателе вероятности выше 99,9% отцовство считается доказанным.

Оптимальный набор локусов для достоверного анализа ДНК

Стандартный анализ на установление отцовства осуществляют по 25 генетическим маркерам. При расширении панели тестируемых маркеров повышается и точность производимого анализа.

Генетические маркеры, используемые при анализе ДНК, должны обладать высокой полиморфностью, то есть иметь не 2 аллели (варианта), а значительно больше до 10 и более. На точность результатов генетической экспертизы также влияет количество тестируемых локусов и природа локуса.

Расширенный анализ 25-40 локусов проводят: ·

• Если на отцовство тестируются несколько мужчин, состоящих в кровном родстве. У них генетический материал содержит большее количество одинаковых аллелей, чем в популяции. Поэтому для более точной идентификации, необходимо изучение дополнительных локусов.
• Если в результате мутации в генетическом профиле не совпадает одни локус, то при исследовании 16 локусов процент вероятности отцовства достигнет всего 95%, что не является достаточным доказательством биологического родства. Только увеличение количества ДНК-маркеров в тестировании (до 40) позволит повысить этот процент до необходимых 99,9%.

При установлении родства специалисты при положительном результате указывают, что родство не может быть исключено. При отрицательных результатах заключение носит более категорический характер: родство исключено.

Незначительное отклонение от 100% при определении вероятности отцовства объясняется тем, что не исключается теоретическая возможность существования в мире человека с таким же генетическим профилем, как и у тестируемого мужчины.